菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检样品进行卫生学评估提供...

问题详情：

菌落总数可作为判定食品被污染程度的标志，也可以用于观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对送检样品进行卫生学评估提供*据。下图是某样品培养简化流程图，请分析回答下列问题：

（1） 该营养琼脂培养基配制过程中，其基本步骤包括按照培养基*准确计算、称量、溶化、调节pH、____法灭菌等。然后将培养基放入47 ℃水浴锅保温，选择此温度的理由是____。

（2） 实验过程中须将样品剪碎并使用均质器10 000 r·min-1处理1 min，其目的是________。从水浴锅取出营养琼脂培养基倒平板适量，稍冷却后移液1 mL于培养皿进行涂布，涂布时可____，使涂布更均匀。

（3） 本实验用菌落计数的原理是基于____，运用这种方法统计的结果往往较实际值偏____。具体培养结果如下表。选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当只有一个稀释梯度的平均菌落数符合此范围，以该培养皿菌落数×稀释倍数报告。当有两个梯度菌落值在30～300之间，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五入；若比值大于2，则报告稀释度较低（稀释次数越多，稀释度越高）的培养皿菌落数。请填写例次2、3中“?”处的菌落总数分别为____、____。

【回答】

高压蒸汽    保*培养基处于溶化状态（在凝固之前接种且不致将培养物烫死）    尽量使样品中的微生物细胞分散    转动培养皿    一个菌落代表一个活菌    小    38000    27100   

【分析】

各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及温度的要求。根据培养基中是否含有琼脂，即琼脂的多少可以将培养基分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。制备固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

【详解】

（1）配制培养基时应按照培养基*准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，并进行高压蒸汽灭菌；然后将培养基放入47 ℃水浴锅保温，用手触摸不烫手还便于*作，并能保*培养基处于溶化状态，且在凝固之前接种不致将培养物烫死。

（2） 实验过程中要将样品剪碎并使用均质器10 000 r·min-1处理1 min，尽量使样品中的微生物细胞分散；为了使涂布更均匀，涂布时可转动培养皿。

（3） 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，因此一个菌落可代表一个活菌。但在培养过程中，可能不是一个活菌形成一个菌落，因此运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。结合题干可知，报告菌落总数时，应选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当有两个梯度菌落值在30～300之间时，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数，且菌落数大于100取两位有效数字，两位之后的数值四舍五入；若比值大于2，则报告稀释度较低的培养皿菌落数。因此例次2应选择10-2和10-3的菌落数，且295记为30，该培养皿菌落数为（30+46）÷2=38，故例次2的菌落总数为该培养皿菌落数×稀释倍数，既38×1000=38000，例次3应选取10-2的菌落数报告，则3菌落总数为271×100=27100。

【点睛】

本题旨在考查微生物的分离和培养、某种微生物数量的测定，意在考查具备验*简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行处理和报告，具有对一些生物学问题进行初步探究的能力。

知识点：微生物的培养与应用

题型：综合题