在如图所示的质粒PZHZ11(总长为4.0kb,1kb=1000对碱基因)中,lacZ基因编码β﹣半乳糖苷酶,...
问题详情:
在如图所示的质粒PZHZ11(总长为4.0kb,1kb=1000对碱基因)中,lacZ基因编码β﹣半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将白*的大肠杆菌染成紫*.
(1)若先用限制酶BamHI切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含4.0kb质粒的细胞颜*为 ,含3.5kb质粒的细胞颜*为 .
(2)若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段,形成5.0kb的重组质粒,则目的基因长度为 kb.
(3)上述5.0kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得2.0kb和3.0kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则可获得 kb和 kb两种DNA片段.
(4)若将人的染*体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产物的*物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于
A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程.
【回答】
解:(1)若先用限制酶BamHⅠ切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,则破坏了lacZ基因,导致β﹣半乳糖苷酶不能合成.而β﹣半乳糖苷酶催化生成的化合物能将变*的大肠杆菌染成蓝*,所以含3.5kb质粒的细胞颜*为白*;含4.0kb质粒的细胞中,如果lacZ基因能正常表达,则颜*为紫*;如果lacZ基因不能正常表达,则颜*为白*.
(2)若将两段分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段,形成5.0kb的重组质粒,则目的基因长度为5.0﹣(4.0﹣0.5)=1.5kb.
(3)上述5.0kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得2.0kb和3.0kb两种DNA片段,说明右侧BamHI和EcoRI之间的长度为2.0;用联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则切割的是BamHI左侧的位点,可获得2.0+1.5=3.5kb和5.0﹣3.5=1.5kb两种DNA片段.
(4)由于将人的染*体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并坚定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,并将产物的*物单独注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,所以该过程属于植物基因工程.
故*为:
(1)白*和紫*/白*或紫* 白*
(2)1.5
(3)1.5 3.5
(4)C
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题