图1为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗基因，Tc为四环素抗基因，lacZ为蓝...

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图1为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗*基因，Tc为四环素抗*基因，lacZ为蓝*显*基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度．请据图回答：

（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是　　、　　．

（2）如果是两两重组，可能有　　种长度的重组结果．

（3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤．现运用　　酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb和　　kb，或者　　kb

和　　kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的*入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）．

（4）将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是　　（多选）．

A．质粒 B．动物病毒 C．噬菌体 D．植物病毒

（5）为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在培养基上培养，得到如图示2的菌落．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含　　的培养基上培养，得到如图3的结果（空圈表示与图2对照无菌落的位置），挑选目的菌的位置为　．

【回答】

解：（1）由图可知，质粒A中缺少标记基因，质粒C中的复制原点被酶切割，所以A、C不能作为运载体．

（2）用DNA连接酶连接时，可能出现质粒环化、目的基因环化、形成重组质粒，有3种长度的结果．

（3）根据题意，质粒长度为2.7kb，目的基因长度为4.0kb，所以重组质粒长度为6.7kb，出现长度为1.1kb，则另一个长度为5.6kb，若目的基因重组时倒置，可形成3.1kb和3.6kb的片段．

（4）基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，故导入大肠杆菌的载体可以是质粒和噬菌体．

（5）为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在培养基上培养，得到如图乙的1的菌落说明质粒已经导入．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图乙的2的结果，无菌落的位置表示不抗氨苄青霉素，说明为重组质粒，故挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落．

故*为：

（1）缺少标记基因复制原点被限制酶切割

（2）3

（3）EcoRⅠ5.6 3.1 3.6

（4）A C

（5）氨苄青霉素图1培养基中对应图2中消失的菌落

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题