基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下：第一步：从小鼠囊胚中分离...

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 基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下：

第一步：从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞（ES），在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

第二步：构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入neoR（新霉素抵抗基因）等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对，所以能将表达载体准确地带到靶基因的位置。

第三步：将表达载体导入胚胎干细胞，并与其内靶基因同源重组，完成胚胎干细胞的基因改造。

第四步：基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如下图所示。

请根据上述资料，回答下列问题：

（1）在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前，应首先完成              ，在这过程中所需要的工具酶是                              。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞通常是            。若用大肠杆菌储存目的基因，则需先将其处理为             细胞。

（3）上述资料中neoR基因的作用最可能是                               。

（4）（2）中获得的小鼠，通过有*生殖产生的后代是否都含该目的基因？       。为什么?             。

【回答】

（1）表达载体的构建    限制*核*内切酶（答限制酶也给分）和DNA连接酶

（2）受精卵            感受态

（3）作为标志基因，便于筛选

（4）否      在形成生殖细胞时等位基因（目的基因和靶基因）会发生分离

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题