将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力．以下是与植物疫苗制备过程相关...

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将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力．以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表． 表1 引物对序列表

表2 几种限制酶识别序列及切割位点表

请根据以图表回答下列问题． （1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是         基数量和种类来设定．表1根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图．请判断哪一对引物可采用较高的退火温度            ． （3）目的基因*入质粒后，不能影响质粒的       ．载体构建过程需要的工具酶为         和           （4）图1步骤3所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一*要求      （5）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转基因所用的细菌B通常为    ． （6）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断． ①采用EcoRI和PstI酶切，得到     种DNA片断． ②采用EcoRI和SmaI酶切，得到        种DNA片段．

【回答】

解：（1）PCR方法扩增目的基因的过程中，需要进行高温解链过程，因此使用的DNA聚合酶要具有耐高温的特*． （2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个*键，稳定*强．引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度． （3） （4）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一*要求． （4）植物基因工程中，将目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法，因此常用农杆菌做受体细胞． （5）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点．因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子，而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，只能产生一种DNA片断． 故*为： （1）耐高温   （2）引物对B   （3）复制 限制酶 连接酶   （4）否     （5）农杆菌     （6）①2  ②1

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题